逆转录的基本过程和发现意义(逆转录的原理是什么)

生活百科 2023-04-28 21:31生活百科www.xingbingw.cn

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原理从组织或细胞中提取总RNA,以其mRNA为模板,然后用寡或随机引物通过逆转录酶逆转录成cDNA。然后,cDNA被用作PCR扩增的模板,以获得目的基因或检测基因表达。过程以dNTP为底物,RNA为模板,tRNA为引物,在逆转录酶的作用下。本文按照53的方向,合成了与RNA模板互补的DNA单链。然后它与RNA模板形成RNA DNA杂交体,然后在逆转录酶的作用下,RNA链被水解,然后以这个DNA为模板合成第二个DNA。逆转录是病毒复制的形式之一,如RNA病毒中的逆转录病毒、DNA病毒中的嗜肝DNA病毒、花椰菜花叶病毒等。逆转录过程也存在于真核细胞中,如逆转录转座子、端粒DNA延伸等,都需要逆转录酶的催化。逆转录过程的揭示是分子生物学研究的重要发现,是对中心法则的重要修正和补充。【逆转录的原理和主要过程】通过在体外模拟这一过程,人们以从样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成互补的cDNA,构建cDNA文库,从中筛选出特定的靶基因。该方法已成为基因工程技术中获取目的基因最常用的策略之一。

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