梅毒患者与梅毒生物学假阳性人群抗心磷脂抗体的异质性及凝血功能

【摘要】：目的抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)存在beta 2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)依赖型与β2-GPⅠ非依赖型两种性质类型。前者主要存在于抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid antibody syndrome,APS)等自身免疫性疾病患者中梅毒患者,且可导致患者出现动/静脉血栓形成和血小板减少等凝血功能异常表现;而β2-GPⅠ非依赖型ACA则主要存在于感染性疾病患者中,且与上述临床表现无关。另外研究发现某些感染性疾病患者可能存在凝血功能障碍,而梅毒患者的凝血功能未见报道。而近来报道感染性疾病可能也存在β2-GPⅠ依赖型ACA。梅毒患者与梅毒生物学假阳性(biological false-positive,BFP)人群血清中均存在梅毒非特异性抗体阳性,ACA作为梅毒非特异性抗体的主要组分,但其β2-GPⅠ依赖性质和凝血功能仍有待进一步明确。本研究重点明确梅毒患者与BFP人群中ACA的异质性,同时探讨其与凝血功能的相关性。方法共纳入675例患者(包括梅毒患者465例,BFP人群146例,APS患者64例)以及选取新西兰雄兔8只。使用化学发光试验方法检测实验人群的血清β2-GPⅠ依赖型ACA IgA/IgG/IgM和抗β2-GPI IgA/IgG/IgM抗体以及活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原浓度(fibrinogen concentration,FIB)和血小板计数等相关常规凝血功能指标;使用自行构建ELISA方法检测实验兔血清β2-GPI依赖型ACA,同时使用性病研究实验室试验(venereal disease research laboratory,VDRL)检测实验兔血清梅毒非特异性抗体情况。

结果BFP人群与APS患者血清β2-GPⅠ依赖型ACA和抗β2-GPⅠ抗体的阳性率均高于梅毒患者,差异有统计学意义(BFP:22.60%和28.77%,APS:32.81%和32.81%,梅毒:3.87%和1.08%;P0.001);而BFP人群与APS患者血清自免抗体阳性率无统计学差异(P=0.119;P=0.556)。梅毒患者与BFP人群血清β2-GPⅠ依赖型ACA浓度水平和阳性率均与快速血浆反应素试验(rapid plasma regain,RPR)滴度均无统计学相关性(P0.05)。梅毒患者血清β2-GPI依赖型ACA和抗β2-GPⅠ抗体的主要亚型均为IgM;而BFP人群和APS患者则以IgG亚型为主,且其IgA亚型抗体也有较高的检出率。本研究还发现与梅毒患者相比,BFP人群和APS患者的APTT(P0.001)、PT(P0.001)延长,FIB降低(P=0.022),血小板计数减少(P0.001)。与自身免疫性抗体阴性的各组人群相比,自身免疫性抗体阳性的梅毒患者、BFP人群与APS患者的APTT均有延长(P0.05)。另外,对实验兔免疫偶联牛血清白蛋白的心磷脂抗原后可诱导其产生β2-GPⅠ依赖型ACA,并可导致部分实验兔的VDRL检测结果呈阳性。

结论梅毒患者和BFP人群的ACA存在异质性,梅毒患者的ACA为β2-GPⅠ非依赖型梅毒患者,而BFP人群存在明显比例的阳性β2-GPⅠ依赖型ACA,且其阳性率接近于阳性对照的APS患者,同时推测β2-GPⅠ依赖型ACA可能是导致梅毒生物学假阳性现象的原因之一。另外,β2-GPⅠ依赖型ACA与梅毒非特异性抗体检测的一致性差,β2-GPⅠ依赖型ACA浓度和阳性率与梅毒非特异性抗体滴度均无统计学相关性,提示β2-GPⅠ依赖型ACA与梅毒非特异性抗体检测方法所测的ACA是不同的。凝血功能分析发现与梅毒患者相比,BFP人群更易出现凝血功能障碍倾向,且自身免疫性抗体可能通过内源性途径影响机体的凝血功能。