进口高效液相色谱仪哪个品牌好(高效液相色谱仪型号有哪些)

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高效液相色谱仪和气相色谱仪的异同？液相色谱仪和气相色谱仪都是用色谱进行分析的，但实际上是有区别的，主要表现在以下几个方面

，概念不同

1.气相色谱仪

气相色谱法是一种物理分离方法。利用被测物质各组分在不同相中分配系数(溶解度)的微小差异，当两相相对运动时，这些物质在两相之间反复分配，这样只有微小的性质差异才有很大的作用，不同组分被分离。

2.液相色谱仪

高效液相色谱是指在经典色谱基础上发展起来的气相色谱理论。技术上，流动相改为高压输送；色谱柱采用特殊方法填充小粒径填料，使柱效远高于经典液相色谱(每米塔板数可达数万或数十万)；，在柱后连接高灵敏度检测器，对流出液进行连续检测。

第二，适用范围不同。

1.气相色谱仪

分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。

受技术条件的限制，沸点过高或热稳定性差的物质很难用气相色谱进行分析。对于那些不挥发或加热到500以下不易分解的物质，一般可采用衍生或裂解的方法。

2.液相色谱仪

高效液相色谱只要求样品可以制成溶液，不需要气化，所以不受样品挥发性的限制。原则上可以用高效液相色谱法分离分析沸点高、热稳定性差、相对分子质量大(400以上)的有机化合物(有些物质几乎占总有机化合物的75%-80%)。据统计，大约20%的已知化合物可以用气相色谱分析，而大约70-80%可以用液相色谱分析。

第三，仪器结构不同

气相色谱仪

它由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度都在控制之下。

1.列框

色谱柱是气相色谱仪的心脏。样品中的各组分在色谱柱中反复分配后被分离，从而达到分析的目的。柱箱的作用是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别与进样器和检测器相连，所以进样器和检测器的下端(连接器)插入柱盒。该柱可配各种填充柱和毛细管柱，操作方便。色谱柱(样品)需要在一定的温度下工作，所以柱箱的温度由微机控制。而且由于设计合理，柱箱内的坡度很小。

对于一些成分复杂、沸程较宽的样品，还可以通过三步程序升温来控制柱箱。而且程序设置好之后，可以自动运行，不需要人工干预，温度降低的时候可以自动开门散热。

2.样品注射器

注射器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品，进样器也必须将其蒸发。，使用微型计算机来控制注射器的温度。

根据色谱柱的不同种类和进样方式的不同，有五种进样器可供选择填充柱进样器；毛细管而不流入样品装置的附件；毛细管分流注射器附件；毛细管分流/分流取样器；六阀气体取样器。

3.检测器

探测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号(电信号)。

探测器也需要一定的温度条件才能正常工作，所以采用微机控制

该系统能够对测试数据进行采集、存储、显示、打印和处理，以便正确地进行样品分离、制备或鉴定。

液相色谱仪

高效液相色谱主要由进样系统、输注系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

1.样品注入系统

一般采用隔膜注射器或高压注射室完成注射操作，注射量恒定。

这有利于提高分析样品的重复性。

2.输液系统

该系统包括高压泵、流动相储罐和梯度仪三部分。高压泵一般压力为l.47-4.4X107Pa，流量可调，稳定。高压流动相通过色谱柱时，可以降低样品在柱内的扩散效应，加快其在柱内的运动，有利于提高分离度，回收样品，保持样品的生物活性。流动相储存误差和梯度仪可使流动相随固定相和样品的性质而变化，包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或换成另一种。

3.分离系统

该系统包括色谱柱、连接管和恒温器。

一般色谱柱的长度为10-50cm(如需两柱并用，可在两柱之间加连接管)，内径为2-5 mm，由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金制成，柱内装有直径为5-10m的固定相(由基质和固定液组成)。固定相中的基质由机械强度高的树脂或硅胶制成，它们具有惰性(如硅胶的二氧化硅基因已基本去除)、多孔性和大比表面积。，硅胶表面还机械包覆(与气相色谱固定相的制备相同)或化学偶联各种基因的有机化合物(如磷酸基团、季胺基团、羟甲基、苯基、氨基或各种碳链的烷基)或配体。

，这种固定化对不同结构的物质具有良好的选择性。例如，将豌豆凝集素(PSA)偶联在多孔硅胶表面后，可以分离成纤维细胞中的糖蛋白。

，固定相的基质颗粒较小，柱床容易达到均匀致密的状态，容易降低涡旋扩散效应。基质粒径小，微孔浅，样品在微孔中的传质时间短。这些都有利于缩小带宽，提高分辨率。根据塔效率的理论分析，基体粒径越小，塔板理论数n越大。

这进一步证明了小粒径的基质会提高分辨率。，HPLC的恒温箱可以将温度从室温调节到60。通过提高传质速率和缩短分析时间，可以提高色谱柱的效率。

4.探测系统

高效液相色谱中常用的检测器有三种紫外检测器、折光率检测器和荧光检测器

(1)紫外线检测器

该检测器适用于检测紫外(或可见光)吸收样品。

其特点用途广泛(如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素均可)；灵敏度高(检出限为10-10g/ml)；线性范围宽；对温度和流量的变化不敏感；可以检测由梯度溶液洗脱的样品。

(2)差示折射检测器

折射率不同于流动相的任何样品组分都可以用示差折光检测器检测。该检测系统用于检测碳水化合物。该系统通用性强，操作简单，但灵敏度低(检出限为10-7g/mL)。流动相的变化会引起折光率的变化。不适合痕量分析或梯度洗脱。

荧光检测器

在一定条件下，任何具有荧光的物质的发射光的荧光强度与该物质的浓度成正比。，这种检测器只适用于测定带有荧光的有机化合物(如多环芳烃、氨基酸、胺、维生素和某些蛋白质等)。)，及其敏感性

高效液相色谱仪主要包括哪些部分？高效液相色谱仪由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理记录系统组成，包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录器或数据工作站。

其整体组成与气相色谱相似，但根据其流动相为液体的特点做了很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定稳定；采样系统要求采样方便，开关严密；由于液体流动相的粘度远高于气体，为了降低柱压，高效液相色谱的色谱柱一般较粗，长度也比气相色谱柱短得多。高效液相色谱广泛应用于定量和定性分析的几乎每个领域。

使用高效液相色谱时，将待测液体物质注入色谱柱，通过压力在固定相中移动。由于被检测物种的不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质依次离开色谱柱，检测器得到不同的峰信号。，可以通过分析和比较这些信号来判断待检测物质中包含的物质。

扩展数据

高效液相色谱只要求样品可以制成溶液，不受样品挥发性的限制。流动相选择范围广，固定相种类多，可以分离各种分子量范围的热不稳定和不挥发、解离和未解离的物质。

结合样品预处理技术，高效液相色谱实现的高分离度和高灵敏度使得分离和测定具有非常相似性质的物质以及分离复杂相中的痕量组分成为可能。随着固定相的发展，有可能完成具有足够活性的生化物质的分离。

高效液相色谱法已成为解决生化分析问题的最有前途的方法。高效液相色谱具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可重复使用、流出液组分易于收集等优点，广泛应用于生物化学、食品分析、医学研究、环境分析、无机分析等领域。高效液相色谱与结构仪器的结合是一个重要的发展方向。

液相色谱-质谱联用技术越来越受到重视，如氨基甲酸酯类农药和多核芳香烃的分析。液相色谱与红外光谱的结合也得到了迅速发展，如在环境污染分析中测定水中的烃类和海水中的非挥发性烃类，使环境污染分析得到了新的发展。

什么是高效液相色谱仪？气相色谱仪的基本结构有两部分，即分析单元和显示单元。前者主要包括气源及控制计量装置、取样装置、恒温装置和色谱柱。后者主要包括校准器和自动记录仪。色谱柱(包括固定相)和检测器是气相色谱仪的核心部件。

(1)载气系统气相色谱仪中的气路是一个封闭的管道系统，载气在其中连续运行。整个载气系统要求载气纯净，密封性好，流量稳定，流量测量准确。

(2)进样系统是将气体或液体样品以均匀的速度定量地加入到色谱柱的顶部。

(3)分离系统分离系统的核心是色谱柱，其作用是将多组分样品分离成单一组分。色谱柱分为填充柱和毛细管柱。

(4)检测系统的检测器的作用是将色谱柱分离出的样品组分按其特性和含量转换成电信号，经放大后由记录仪记录成色谱图。

(5)信号记录或微机数据处理系统近年来，气相色谱仪主要采用色谱数据处理器。色谱数据处理器可以打印记录的色谱图，并可以打印出处理后的结果，如保留值

高效液相色谱的应用及原理分析高效液相色谱是分析实验室常用的检测仪器之一，应用越来越广泛。本仪器在使用过程中，不可避免地会出现各种问题，直接影响测量数据的准确性和仪器的正常运行。如果操作者能够了解故障的原因，他就能够清楚地了解预防和排除这些故障的方法，从而能够正确地使用仪器并充分发挥其性能。今天从以下几个方面性病网给大家分享一下使用HPLC时应该注意的一些问题。

，使用试管的问题

1.试管的清洁度。

高效液相色谱(HPLC)是一种非常灵敏的分析方法。如果使用不干净的试管，测试结果的准确性会受到影响。例如，当使用甲醇作为溶剂来溶解样品时，所使用的小试管覆盖有橡胶塞。，每次进样都有一个固定保留时间的干扰峰。经确认，此干扰峰是由胶塞浸泡在甲醇中溶解的成分引起的，更换玻璃试管后干扰峰消除。

2.塑料试管的溶解。

近年来，一次性塑料试管给检测者带来了极大的便利。但在使用过程中必须注意试管中有机溶剂的溶解。当用这种试管提取样品时，一些有机溶剂(如氯仿等。)溶解在管壁中，这些溶解物质有时会在检测器上产生信号，从而干扰样品的测定。此时，可以先用同样的实验条件对其进行测试，看被萃取的溶液在不含被萃取物质的情况下，是否能在检测器上产生干扰信号。如果有干扰信号，只能换成耐有机溶剂的玻璃试管。

3.被测样品在试管壁上的吸附。

这个问题也要注意，否则会影响测试结果的准确性。在治疗药物监测(TDM)中，阿米替林、丙咪嗪等一些被测药物容易吸附在玻璃试管壁上。，手术中应使用聚丙烯管。为防止萃取过程中吸附的发生，可采用0.5%己二胺溶液作为萃取剂，可有效防止吸附。

第二，操作喷射阀的问题

目前，7725进样阀常用于分析型高效液相色谱。其内部六通阀结构使得注射操作非常方便，但如果使用不当，也会带来问题。例如，在高效液相色谱过程中，有时会出现色谱峰异常、重现性差等问题，主要是操作方法不当造成的。解决此类问题，需要从以下几个方面入手。

1、样品体积的控制。

进样阀用于进样时，阀内的样环是定量的(一般分析进样阀的样环体积为20ul)。由于注入进样阀的样品溶液在样品环的管道中存在径向速度梯度(即管轴处的液体流速快于管壁处的液体流速)。，为了用样品溶液填充样品定量环并使用进样阀进行精确定量，进样量必须大于样品定量环体积的2倍。如果用注射器控制进样量，最大进样量只能是样品环体积的1/2，以免部分样品从溢流管溢出，造成定量分析误差。

2.喷射阀的清洁。

如果样品环中有上次进样的样品残留，必然会污染下次进样的样品。为了防止这种现象，应该采取以下步骤a .喷射阀有两个位置，喷射和装载。在进样位置，用注射器将流动相注入进样阀进行多次清洗，用量约为40ul每一次；b .然后手动将进样阀板转到进样位置时，用流动相冲洗几次，剂量仍为40ul每一次；，将样品注入进样阀。

根据上述步骤，可以避免注射阀造成的污染，从而消除干扰

有时，进样阀的溢流管堵塞，样品注入进样阀时，注射针头推不动。这次故障是由溢流管堵塞引起的。堵塞大多是溶解样品的流动相中使用的盐溶液造成的，其中的盐在溢流管的排空口结晶。此时，可用小烧杯中的少量蒸馏水稍微浸泡溢流嘴，可溶解端口处的盐结晶，从而排除故障。如果每次注射后可以用蒸馏水反复冲洗溢流管中的盐，就可以避免这种故障。

第三，移动阶段(MOBLLE PHASE)

高效液相色谱中常用甲醇和乙腈制备流动相。HPLC常用的试剂最好是高档的专用试剂，比如色谱纯试剂。当要求不太严格时，也可以使用优级纯甚至分析纯试剂。高效液相色谱中常用紫外检测器。，为了降低基线噪声，提高分析灵敏度，应使用低紫外吸收、低杂质含量的色谱纯试剂。

1.流动相的过滤。

配制好的流动相在使用前必须用0.5um微孔滤膜过滤。这是因为溶液中含有许多肉眼难以发现的微小颗粒。如果不滤出，泵口和柱头上的过滤器就会堵塞，从而堵塞流动相的正常通道，增加色谱柱的阻力，增加柱压，降低柱效。在这种情况下，应改用过滤后的流动相，将堵塞的过滤器取出，浸泡在20%的硝酸水溶液中，用超声波清洗器清洗20分钟，以清除过滤器上的堵塞物。

2.流动相脱气。

流动相在使用前必须脱气，以便尽可能多地除去溶解在流动相中的气体，否则这些气体会降低色谱柱填料的性能，并对检测器的信号造成很大的干扰。脱气方法有很多种，如超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。真空脱气和氮气流脱气是目前最常用的脱气方法。当与水和甲醇混合时，会产生大量的气泡。如果不脱气使用，气泡会进入色谱柱和检测器，影响正常分析。

四。色谱柱的使用和维护

色谱柱是高效液相色谱仪最重要的组成部分，色谱柱的性能对被测物质的分离和测定起着决定性的作用。，在日常工作中，要特别注意色谱柱的正确使用和维护，以延长色谱柱的使用寿命。

1.使用预柱和保护柱。

预柱安装在泵和进样器之间，为色谱柱内的流动相提供完全平衡，防止破坏色谱柱填料的组分或污染物进入色谱柱。保护柱可以阻挡能牢固吸附在色谱柱上的组分进入色谱柱，保护柱应与色谱柱的填料相同。可以经常更换预柱和保护柱，而不是经常更换色谱柱，延长了色谱柱的使用寿命。

2.防止气体进入色谱柱。

有些色谱柱(如凝胶柱)是不允许气泡进入的，否则会降低柱效甚至形成难以驱除的微小气室。，为了防止气泡进入色谱柱，必须使用脱气的流动相，并严格按照以下步骤安装色谱柱。a .取下下色谱柱入口处的密封螺丝，观察是否有溶剂渗出；b .如果有溶剂渗出，将色谱柱连接到管道上，避免气泡进入；如果没有溶剂渗出，表明空气已经进入色谱柱的这一端。此时可将色谱柱的出口端连接到进样阀上，用流动相反方向冲洗色谱柱，以除去co中的空气

为了防止被测物质和杂质留在色谱柱内，每次样品分析后都要及时清洗色谱柱。，色谱柱要用对被测样品有较强洗脱能力的溶剂进行洗脱。以常用的反相色谱分析方法为例。因为第一个流出物质是极性物质，所以应该使用100%甲醇或极性稍弱的溶剂如异丙基纯和四氢呋喃来洗脱吸附在柱上的极性物质。洗脱剂的量通常是柱体积的20倍。如果流动相是缓冲溶液，则应该用蒸馏水清洗色谱柱以洗去色谱柱中的盐，然后用合适的溶剂清洗。

凝胶过滤色谱(Gel Filtration Chromatography)中使用的凝胶柱通常使用缓冲溶液作为流动相，使用后必须用蒸馏水清洗。如果是连续操作，缓冲液可以在柱内放置过夜，但最好保持小流量(<<0.5ml/min)，防止缓冲盐沉淀。如果流动相含有卤化物，即使停止过夜，也必须用蒸馏水将色谱柱清洗干净，以防止卤化物腐蚀色谱柱。

4.色谱柱的储存。

如果色谱柱暂时不用，在储存过程中应注意以下几点

A.几天内短期存放，要用溶剂(如凝胶柱、蒸馏水)冲洗色谱柱，然后用密封螺丝将色谱柱两端密封。

B.如果色谱柱长期不用，只能用上述方法处理不了。此时，色谱柱应充满色谱柱使用说明书中规定的溶剂。反相柱一般用甲醇，正相柱可以用正己烷或庚烷，凝胶柱不能用水。因为微生物在柱内生长会降低柱效，所以要用0.05% NaNs水溶液(防腐剂)冲洗色谱柱，然后将色谱柱密封严密。色谱柱长时间放置时，必须将色谱柱两端密封严密，防止溶剂挥发造成色谱柱填料干燥收缩，严重降低柱效。

C.色谱柱应储存在室温下。如果放在0以下的环境中，色谱柱会冻结，也会导致柱效降低。

高效液相色谱(HPLC)的结构一般由高压灌注系统、进样系统、分离系统、记录和检测系统以及数据处理系统组成。制备仪器还应配备馏分收集系统。为了获得更好的分析结果，HPLC仪器对结果的准确度、精密度、灵敏度和重现性有更高的要求。

高效液相色谱仪的工作原理

储液器中的流动相由高压泵泵入系统，样品溶液通过注射器进入流动相，由流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中的组分在两相中具有不同的分配系数，当它们在两相中相对移动时，经过反复的吸附-解吸分配过程，组分的移动速度差别很大，组分被分离成单个组分依次流出柱外。当通过检测器时，样品浓度被转换成电信号进行传输。

扩展信息

高效液相色谱(HPLC)的结构一般由高压灌注系统、进样系统、分离系统、记录和检测系统以及数据处理系统组成。制备仪器还应配备馏分收集系统。为了获得更好的分析结果，HPLC仪器对结果的准确度、精密度、灵敏度和重现性有更高的要求。

A

比赛

高压输液系统

高压输注系统包括溶剂储存瓶、溶剂脱气装置、高压输送泵和梯度洗脱装置。其中，高压输液泵是高效液相色谱仪的主要部件之一，输送压力达到150—350105P

色谱分离系统色谱柱通常是填充有各种填料的不锈钢柱。常用的填充剂是硅胶，可用于正相色谱；根据键合基团的不同，化学键合固定相可用于反相或正相色谱。其中最常用的是十八烷基键合硅胶，即ODS柱，可用于反相色谱或离子对色谱。

检测系统检测系统用于连续检测色谱柱流出的物质，进行定性和定量分析。它要求灵敏度高、噪声低、基线稳定、响应值线性范围宽。近年来，各国都在研发新的检测技术，进一步拓展了高效液相色谱的应用。

根据检测要求，不同的检测器可分为紫外检测器(UVD)、折光率检测器(RID)、电化学检测器(ECD)、红外检测器(IRD)、核磁共振检测器(NMRD)、质谱检测器(MSD)、蒸发光散射检测器(ELSD)和小角激光散射检测器(LALLSPD)。

数据处理系统高效液相色谱的分析结果除了可以由记录仪绘制谱图外，还可以由微处理器和色谱数据工作站进行记录和处理。

好了，关于HPLC和HPLC品牌的内容到此结束。希望对你有帮助。

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